JHu a zhongUn ivS c iT e chno l[M edS c i ] 34 ( 2 ) :1 76 18 0 , 2 01 4 DO I10 . 10 07 / s1 15 9 6 -0 14 -1 25 4 8 JH u a z hongU n ivS c iT e c hno l ［M e dS c i］ 34 (2 ) :2 01 4

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D e t e c t i ono fC y t ok in eE xp r e s s i onP a t t e rn sinth eP e r iph e r a lB l o odo f * Pa t i en t sw i thA cu t eL euk em iabyAn t ibody M i c r oa r rayAna ly s i s 1† 1 ,2† 1 1# 1 Q ingL I(李 青) ,M e iL I( 李 梅) ,Y ao -hu i WU( 吴耀辉) ,X i ao j i anZHU( 朱晓健) ,Ch enZENG( 曾 辰) , 1 1# P ingZOU(邹 萍),Zh i ch aoCHEN( 陈智超) 1 In s t i tu t eo fH em a to log y ,Un ionHo sp i ta l ,T ong j iM ed i ca lCo l l eg e ,Hua zhongUn i v e r s i t yo fS c i en c eandT e chno log y ,W uhan430022 , Ch ina 2 D epa r tm en to fP ed ia t r i cH ema to log y ,Un ionHo sp i tal ,Fu j ian M ed i ca lUn i v e r s i t y ,Fu zhou350001 ,Ch ina

©Hu a zhongUn iv e r s i tyo fS c i en c eandT e chno lo g y andSp r ing e r -V e r l agB e r l inH e id e lb e r g2014

Summa ry :T h ec y t o k i n e so fa c u t el e u k em i a(AL )p a t i e n t sh av ec e r t a inexp r e s s io np a t t e rn s ,fo rm inga comp l exn e two rkinvo lv edind i agno s i s ,p rog r e s s ion ,andp rogno s i s .W eco l l e c t edth es e rumo fd i f f e r en t ALp a t i en t sb e f o r eanda f t e rcom p l e t er em i s s io n(CR ) fo rd e t e c t iono fcy tok in e sb yu s inganan t ibod y ch ip . Th eexp r e s s ionp a t t e rn so fcy tok in e sw e r ed e t e rm in edb yu s ingb io i n fo rm a t i c scompu t a t ion a l an a l y s i s .Th er e s u l t ss how edth a tth e r ew e r es ig n i f i c an td i f f e r en c e sinth ec y tok i n eexp r e s s ionp a t t e rn s b e tw e enALp a t i en t sandno rm a lcon t ro l s ,a sw e l la sb e tw e ena cu t em y e lo idl euk em i a(AML )anda cu t e l ym p h o b l a s t i cl e u k em i a(ALL ) .I nc on f i rm a to r yt e s t ,EL ISAr ev e a l edth eexp r e s s iono fuPARin AL . Mo r eov e r ,th eb i o in fo rm a t i can a ly si sshow edth a tth ed i f f e r en t i a l lyexp r e s s edcy to k in e samongth e AL g roup sw e r einv o lv edind i f f e r en tb io log i c a lb eh av io r sandw e r ec lo s e lyr e l a t edw i thth ed ev e lopm en to f th ed i s e a s e .I tw a scon c lud edth a tth ecy tok in eex p r e s s ionp a t t e rno fALp a t i en t si ss ign i f i c an t lyd i f f e r en t f romth a to fh e a l th yvo lun t e e r s .A l so ,d i f f e r en c e so fcy tok in eex p r e s s ionp a t t e rn sex i s tb e tw e en AML and ALL ,andb e tw e enb e fo r ea nda f t e rCRint h es a m esub t yp eo f AL , wh i chh o ld sim po r t an tc l in i c a l s ign i f i c an c efo rr ev e a l ingd i s e a s ep rog r e s s ion . K e ywo rd s :c y t o k i n e ;m i c r o a r r a y ;a c u t el euk em i a ;exp re s s ionp a t t e rn s ;b io in fo rm a t i c s

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A c u t el e u k em i a(AL )i sap r im a ry m a l i gn a n tp ro l i f e r a t i ono ft h ebo n em a r row ,t h ei n c i d e n c eo fw h i c hou t num b e r sa l lt h eo t h e rh em a t o l og i c a lt um o r s . Th eb i o l og i c a lb e h av i o ro fALh a sn o ty e tb e e nf u l l ye l u c i d a t ed . I th a sb e e nr e p o r t e dt h a tl e uk em i ac e l l sa n dt h e i rm i c r o [1 ] , env i ro nm en tcou l ds e c r e t el a r g eam ou n t so fcy t ok i n e s wh i c hp l ayanex t r em e lyimpor t a n tr o l ei nt h ed e v e l o p [2 ] r e p o r t e dt h a ts e r umf a c t o r4 m e n to f AL .K im e ta l p l a t e l e tl e v e l sw e r er e l a t e dw i t hr e s p o n s et oc h em o t h e r a pyi np a t i e n t s ,a ndc o u l db eu s e dt op r e d i c tt h ee f f i c a c y o fc h em o t h e r a pyi np a t i e n t sw i t ha cu t em y e l o i dl e u k em i a (AML ) .M o r e ov e r ,i tw a sfoundt h a tth ee l ev a t edl e v e l s o fs e r umi n s u l i n l i k eg r ow t hf a c t o r b i n d i ng p r o t e i n2 ( IGFBP -2 )i nch i ld r e nw i thn ew lyd i ag n o s e da c u t elym ph o b l a s t i cl e uk em i a(ALL )c a np r e d i c tr e cu r r en c e ,andi t [3 ] . i sco n s i d e r e da ni nd e p e nd e n tp r o gn o s t i cf a c t o rf o rALL Th e s es tud i e sr ev e a l edac l o s eco r r e l a t ionb e tw e enas i n g l ec y t o k i n ea ndt h ec l i n i c a lp ro g r e s s i o no fl e u k em i a . How e v e r ,in c r e a s inge v id e n c eind i c a t edt h a tcy tok in e s s e c r e t edbyALc e l l sandt h e i rm i c ro en v i r o nm e n td i dno t Q ingL i ,E -m a i l :l iq ing540 7@hu s t . edu . cn † Bo thau tho r scon t r ibu t edequ a l lytoth i swo rk . # Co r r e spond ing au tho r s , X i ao j i an Zhu , E -m a i l : zhux i ao j i an@hu s t . edu . cn ; Zh i ch ao CHEN ,E -m a i l : ch en zh i ch ao@ hu s t . edu . cn * Th i sp ro j e c tw a ssuppo r t edb yt h eN a t i o n a lN a t u r a lS c i e n c e Found a t iono fC h in a(No .81 170 497 ) .

p l a yt h e i rr o l es e p a r a t e l y ,b u tc o n s t i t u t ea m u l t i no d e , e r e fo r e , m u l t i d im e n s i on a l ,a ndc om p l e xn e two r k[4–6]. Th t h eo v e r a l l ALc y t ok i n en e tw o r kr em a i n st ob ef u l l ya s c e r t a in ed .Int h i ss tudy ,s e rums am p l e sw e r eco l l e c t ed b e f o r ea n da f t e rt h ei nd u c t i o no fc om p l e t er em i s s i on(CR ) i nd i f f e r e n t ALp a t i e n t s ,an dt h ecy t ok i n en e two r kw a s ex am i n edbyt h ecy t o k i n ea n t i body m i c ro a r r ayan a l y s i s i na na t t em p tt oi d e n t i f yt h eim po r t a n tc l i n i c a ls i g n i f i c an c eo fcy t ok i n ee xp r e s s i onp a t t e rn s . 1 MATER IALSAND METHODS 1 . 1S amp l eC o l l e c t i on T h es t u dy w a sa pp r o v e dbyt h eI n s t i t u t eo fR e v i ew B o a r do f U n i on H o s p i t a l ,T on g j i M e d i c a lC o l l e g e , H u a z h on gU n i v e r s i t yo fS c i e n c ea n dT e c hn o l o gy ,C h i n a . Th ei n fo rm edcon s en t sw e r eo b t a i n e df r oma l lt h es ub j e c t s .Th ed i agno s i so f AL w a sb a s e donth er e su l t so f m o rph o l o gy ,imm unop h e no t y p i ng ,an dcy t og e n e t i ca n d m o l e cu l a rb io log i c a l ex am ina t i on .F o ra n t i bo dy m i c ro a r r ay ,f iv es e rums am p l e sw e r eex t r a c t edf r om3p a t i e n t s .S am p l e s1a n d2w e r ef romanAMLp a t i e n tb e f o r e anda f t e rCR .S am p l e s3an d4w e r ef romanALLp a t i e n t b e f o r ea nda f t e rCR ,a nds am p l e5f r omah e a l t hyv o l u n t e e r( c l i n i c a ld a t as h ow ni nt a b l e1 ) .F o rEL ISA ,b l oo d s am p l e sw e r ef r omp a t i e n t sw i t hn ew l yd i agn o s e d ALL ( n= 1 1 ) , ALL -CR(n= 1 ) ,n ew l yd i a g n o s e d AML(n= 2 5 ) , o r AML -CR( n= 1 1 ) ,a ndh e a l t hyv o l u n t e e r s(n= 14 ) .T h e p e r i ph e r a lb lood(2 mL )w a sex t r a c t edf rome a chsub j e c t ,

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JH u a z hongU n ivS c iT e c hno l ［M e dS c i］ 34 (2 ) :2 01 4

f r omwh i c h0 . 5 mLs e rumw a sob t a i n e da f t e rc l o tfo rm a t i ona tr oomt em p e r a t u r e ,a ndc e n t r i f ug a t i ona t3 0 00 r /m i nfo r8 m i n . 1 . 2M i c r o a r r a yandIm ag eA cqu i s i t i on T h eR a yB i oL -S e r i e sH um a nA n t i b ody C h i pw a s f r omK angC h e nB i o t e ch(S h a ng h a i ,C h i n a )andw a su s e d f o rbo t hs am p l ep r e p a r a t i ona n dt e s t i n g .T h ec h i pc a n d e t e c t5 16cy t ok i n e si nh um a ns e r um . Th eop e r a t i o n a l p ro c e s sw a sp e r fo rm e da c co rd i ngt oth ep rodu c tin s t ru c t ion s .B r i e f ly ,th ef i lmw a sp l a c edinth er e a c t ionc a s s e t t e , and2 mLb l o c k i n gb u f f e rw a sad d e da n di n cub a t e df o r 30 m i na tro omt em p e r a t u r e .T h eb l o c k i n gbu f f e rw a s r em ov ed ,a nd1 mLs am p l ew a sad d e da n di n c ub a t e df o r S am p l e

D i agno s i s Cond i t ion

1 AML In i t i a lt r e a tm en t 2 AML R em i s s ion 3 ALL In i t i a lt r e a tm en t 4 ALL R em i s s ion LDH :l a c t a t ed eh yd rog en a s e ;N :n o ;Y :y e s

T ab l e1C l in i ca lf ea tu r e so fpa t i en t s L euko cy t e H emog lob in(g /L ) (G /L ) 12 .47 89 3 .78 92 1 .36 57 2 .05 81

Th ech i pf i lmw a sr e a c t e dw i thach em i lum in e s c e n t s ub s t r a t ea n dt h ed e t e c t i onr e s u l tw a sd i s p l a y e du s i ng r ad i og r ap hf i lmexpo su r e .B yu s i n gt h eS c a nA l y z eim ag e a n a l y s i ss o f tw a r e(E i s e nL a b , USA ) ,t h ee xp o s u r ef i l e s w e r ec o n v e r t e di n t od i g i t a ld a t a ,a n dt h e s er awd a t aw e r e s av e da sa M i c ro s o f tEx c e lf i l e(M i c ro s o f t , USA ) .E a c h po i n tw a sm a rk eda st h eo r i g i n a lg r ayv a l u eob t a i n ed t h r ou g ht h eS c a nA l y z es o f tw a r ebys ub t r a c t i ngt h eb a c k g roundv a l u eo fth ec o r r e c t i on ,andth ec o r r e c t ionv a l u e w a sc o r r e c t e dt ot h epo s i t i v ec on t r o l . Ac y t o k i n ec o r r e c t i onv a l u eo fap a t i e n tt h a tw a s>2o r