Normogramme hematologique et biochimique et variations quotidiennes des parametres de base chez le chien normal Suzanne Sabourin, P. Stanley et C. Chartrand*

RESUME Ces experiences avaient pour but d'etablir un normogramme hematologique et biochimique chez le chien en bonne sante, evoluant a l'interieur d'un laboratoire de recherche. Les resultats obtenus furent tres concluants. L'etude seriee de certains parametres a ete completee chez un deuxieme groupe d'animaux. Une fois qu'un chien en bonne sante est adapte au chenil, les variations quotidiennes du poids, de la temperature, de l'hematocrite et de l'hemoglobine sont peu marquees si la me'thode de determination de ces parametres est standardisee et reproductible.

ABSTRACT These experiments were designed in order to determine normal hematological and biochemical values of normal dogs living in a laboratory environment. The findings were conclusive. Serial studies of some of the basic parameters have been done in a second group of animals. After a short period of conditionHopital SainteJustine, Montreal, Quebec. Le docteur Chartrand re"ut une bourse du Conseil de Recherches medicales du Canada. Ces travaux furent subventionnis par le Conseil de Recherches m6dicales du Canada (MA-4391 et ME4327), le Conseil de Recherches medicales du Quebec (710038) et la Fondation canadienne des maladies du

*Section de Chirurgie Cardio-Vasculaire,

coeur.

Resu le 13 aouit 1974.

Vol. 39

-

October, 1975

ing, daily changes in weight, temperature, hematocrit and hemoglobin are minimal if the methods of analysis are standardized and

reproducible.

INTRODUCTION

Depuis le debut de nos travaux, il nous a paru important de connaitre les normales hematologiques et biochimiques chez les chiens en bonne sante, vivant dans nos conditions experimentales, ainsi que les variations quotidiennes normales de poids, de temperature, d'hematocrite et d'hemoglobine. La revue de la litterature medicale ve'trinaire et clinique nous a permis de retrouver certaines informations. Toutefois, le nombre de donnees etait trop souvent restreint; aussi, certains auteurs ne donnaient souvent qu'une description incomplete des methodes employees ainsi que des conditions du milieu environnant dans lequel leurs experiences etaient poursuivies; ensuite, nous n'avons pu retrouver certaines informations telles que les valeurs normales des constituants de l'equilibre acido-basique plasmatique, ainsi que les variations quotidiennes normales des parametres de base qui nous interessaient; enfin, aucun travail ne groupait simultanement les valeurs normales hemato.logiques et biochimiques ainsi que les variations quotidiennes des parametres de base. Ces raisons mentionnees plus haut nous

397

ont incites a e'tablir ces normogrammes ainsi que les variations quotidiennes normales de certains parametres chez les chiens vivant dans nos conditions experimentales.

MATERIELS ET METHODES Arrives au laboratoire, les chiens sont gardes cinq jours sous observation. Ce delai permet de soustraire du groupe les animaux qui developpent un etat morbide et de selectionner les chiens en bonne condition sur la base de l'examen clinique. Le milieu environnant correspond a celui d'un laboratoire standard de recherche oii le conditionnement se conforme aux regles d'hygiene et de soins des animaux. Les chiens sont gardes dans des cages 'a l'interieur d'une piece oui la temperature se maintient a 70°F. Ils s'alimentent de nourriture seche (Purina) et peuvent s'abreuver 'a volonte. On amene l'animal dans une salle fermee et on le couche sur une table d'examen. Les bruits et tous stimulus exterieurs lui sont evites et l'examen n'est pratique que si l'animal est calme. Nous introduisons un thermometre 'a mercure precalibre dans l'ampoule rectale de l'animal, et apres deux minutes d'attente, nous lisons la temperature. Pour fins de determination de l'hematocrite et de l'hemoglobine, 4 ml de sang sont preleves par une veine antecubitale. On injecte aussitot le contenu de la seringue dans une eprouvette heparinisee. Cette derniere est deposee durant dix minutes sur un agitateur.' L'hematocrite se determine par micromethode. Un tube capillaire Fisher contenant le sang total est depose dans une centrifugeuse2 actionnee 'a 11,500 tours 'a la minute, durant cinq minutes. Par la suite, une echelle rotative3 nous permet d'effec'Aliquot Mixer modele 4651 serie 01635 Ames Co. Canlab, Canadian Laboratory Supply Ltd., C.P. 2090, Station St-Laurent, Montreal, Quebec H4L 4X7. 21nternational Micro Capillary Centrifuge - modele M13. Fisher Scientific Company Ltd. C.P. 1020, Montrial, Quebec H3C 2X3. 31nternational Micro Capillary Reader - CIEC. Fisher Scientific Company Ltd. C.P. 1020, Montreal, Quibec H3C 2X3.

398

tuer une lecture precise que l'on repete pour fins de controle (6). L'hemoglobine se calcule en utilisant 0.2 ml de sang du meme echantillon dilue avec 5 ml de cyanure de potassium dans une eprouvette de verre. Dix minutes plus tard, l'eprouvette est introduite dans le puits d'un hemoglobinometre4 pour fins de lecture (7). Les volumes sanguins se calculent selon la technique suivante: un catheter de Teflon5, introduit dans une veine antecubitale et relie 'a un venopax 78, est d'abord irrigue avec du serum physiologique 0.9% durant une minute afin de verifier la permeabilite du circuit. Au temps 0, 2 ml de diluant contenant 10 microcuries d'albumine marquee 'a l'iode 131 sont injectes rapidement 'a l'extremite distale du catheter. Immediatement apres, 2 ml de salin aspires dans la meme seringue sont reinjectes et suivis d'une infusion sous pression de 50 a 60 ml de serum physiologique. Ces proced's s'emploient afin de s'assurer que la totalite de l'albumine marquee 'a l'iode 131 se trouve en circulation. Cinq et 12 minutes plus tard, on preleve 5 ml de sang par une veine de la patte arriere. On injecte aussit6t cet echantillon dans un tube heparinise et le volume sanguin se calcule selon notre methode dej'a decrite (25). Un echantillon de sang arteriel sert 'a la determination de l'equilibre acido-basique et de l'ionogramme. Sous condition anaerobique, 5 ml de sang sont preleves dans une seringue huilee et heparinisee. L'equilibre acido-basique se calcule par methode d'Astrup' (12). Un second echantillon de 3 ml est preleve dans une seringue seche et aussitot submerge dans 3 ml d'huile. Le ')ilan ionique se determine ensuite par micro-methode7 (20). A la fin des examens, une balance Detecto precalibree permet d'etablir le poids exact du chien. Afin d'apprecier les variations quotidiennes normales du poids, de la temperature, de l'hematocrite et de l'hemoglobine,

4Fisher Hemophotometer Flo-Thru. Fisher Scientific Company Ltd., C.P. 1020, Montreal, Quebec H3C 2X3. 518g, 2 pouces. 6Astrup micro Equipment Radiometer Copenhagen Type AME I modele 22R. Canadian Laboratory Supply Ltd. C.P. 2090, Station St-Laurent, Montreal, Quebec H4L 4X7. 7Appareil Technicon pour bilan ionique. Technicon International of Canada Ltd., 889 Montee de Liesse,

Montreal, Quebec H4T 1P5.

Can. J. comp. Med.

cinq chiens furent etudies quotidiennement durant une periode de 21 jours. Les valeurs des parametres furent compilees et la moyenne, la deviation standard et l'erreur standard de la moyenne furent calculees par ordinateur8.

RESULTATS Au Tableau I figurent les valeurs de

l'hematocrite, de l'hemoglobine, du volume sanguin, de l'equilibre acido-basique et de l'ionogramme. Le Tableau II represente les variations quotidiennes de poids, de temperature, d'hematocrite et d'hemoglobine.

DISCUSSION Ce travail fut effectue selon un protocole bien etabli oii les conditions d'exp&e rimentation ont ete rigoureusement respectees et reproduites. Les chiens etaient acclimates au milieu environnant, qui se conformait aux regles d'hygiene et de soins des animaux. Ils s'alimentaient normalement et ne recevaient aucun medicament. On s'assurait quotidiennement de leur bonne sante et de l'absence de toute maladie cardio-vasculaire, respiratoire, renale ou intestinale. Au moment de l'examen, l'animal etait toujours au repos et calme. Le m6me personnel qualifie procedait 'a ces etudes. Lors des ponctions, on evitait la stase sanguine, l'echantillonnage etait manipule avec precaution, et la determination immediate des differentes analyses s'effectuait selon une methode rigoureuse et toujours reproductible. Cet ensemble de conditions nous permet de conclure que les valeurs obtenues dans cette etude experimentale sont valables et normales. Les valeurs moyennes de l'hematocrite et de l'hemoglobine recueillies chez ce groupe d'animaux sont conformes aux valeurs normales rapportees anterieurement (1, 8, 18, 26). Toutefois, les deviations standards 8Olivetti Programma 101. Olivetti Canada LtWe, 1390 Mills, Ontario.

Don Mills Road, Don

Vol. 39 - October, 1975

ainsi que les erreurs standards de la moyenne sont plus restreintes dans notre 6tude. Ceci peut s'expliquer par les conditions mentionnees plus haut et aussi par le fait que les animaux etaient tous calmes au moment du prelevement. Afin d'obtenir des r6sultats valables du volume sanguin, il faut suivre une technique precise. Aussi, toutes les fois qu'une erreur technique etait detetete ou souples resultats de cette d6termination etaient elimin6s. Nous avons demontre anterieurement la reproductibilite et la precislon de notre methode (25). Les valeurs apparaissant au Tableau I peuvent donc etre considerees comme etant normrhllqs pour des animaux de laboratoire. Nos donnees moyennes sont analogues a celles rapportees par d'autres auteurs, mais les deviations sont plus restreintes et peuvent s'expliquer par les memes facteurs mentionnes plus haut (2, 15, 17, 22, 23). A souligner l'importance de la diete et surtout de l'hydratation normale de nos ani-

~onnee,

maux.

Les valeurs de l'equilibre acido-basique sont facilement reproductibles chez ce groupe d'animaux et les erreurs standards de la moyenne sont faibles. Ces valeurs sont conformes aux normales rapportees anterieurement, mais les deviations standards sont toutefois plus restreintes (5, 14, 19, 21, 24). Parmi les facteurs exposes plus haut pouvant expliquer le faible ecart entre les resultats obtenus dans la presente etude, nous voulons souligner l'im.portance de l'echantillonnage arteriel, de la determination immediate de l'equilibre acido-basique, l'elimination de la stase sanguine, la dose adequate d'anticoagulant dans les contenants et la rigueur de la

technique de manipulation de l'echantillonnage. L'importance de ces details methodologiques a deja ete soulignee par Keneko (13). Aussi, l'ionogramme etait normal chez ces animaux, de sorte qu'aucun effet anormal des concentrations ioniques plasmatiques n'a pu influencer 1'equilibre acido-basique. Quant aux pressions partielles en oxygene et en gaz carbonique, les valeurs sont un peu plus variables que les autres elements de l'equilibre et s'expliquent bien par les differences de rythme respiratoire observees chez les animaux lors des prelevements (5). Enfin, aucune etude de tous les elements de cet equilibre acido-basique selon la methode d'Astrup n'a pu etre retrouvee dans la litterature. L'ionogramme plasmatique a ete evalue 399

TABLEAU I. Valeurs normales chez le chien de laboratoire

Hematocrite

...................

Hemoglobine .................. Volume sanguin ............... Volume erythrocytaire. . Volume plasmatique

%

gm %

ml/kg ml/kg ml/kg

Sodium .mEq/litre mEq/litre Chlorures ..................... Calcium ...................... mEq/litre mEq/litre Magnesium ................... Potassium .................... mEq/litre . pH PCO2 ....................... Exces de bases ................

Hg mEq/litre mEq/litre mEq/litre mEq/litre mEq/litre mm de Hg mm de

Bases tampons Bicarbonates actuels ........... Bicarbonates standards ......... Acide carbonique .............. CO2 total ..................... P02 ....................... Saturation arterielle % = Nombre de sujets N. = Moyenne M. = Deviation standard D.S. E.S.M. = Erreur standard de la moyenne ............

N. 49 39 39 39 39

M. 43.83 15.788 92.08 39.35 52.14

D.S. 3.891 1.980 8.85 5.79 6.58

E.S.M. 0.556 0.317 1.41 0.92 1.05

30 30 30 30 30

146.02 110.78 5.161 1.635 4.398

2.487 1.893 0.277 0.140 0.511

0.470 0.346 0.074 0.034 0.104

.28 28 28 28 28 28 28 28 28 28

7.408 31.32 3.682 43.83 19.63 21.27 0.977 20.47 102.12 97.33

0.0223 3.036 1.515 2.372 1.677 1.232 0.084 1.678 10.057 0.333

0.573 0.286 0.448 0.317 0.232 0.015 0.317 1.901 0.063

0.004

TABLEAU II. Variations quotidiennes du poids, de la temperature, de l'hematocrite et de l'hemoglobine chez le chien normal Chiens Poids ............

.....

.....

M D.S.

102.58 0.6030 0.1740

101.37 0.2672 0.0496

101.59 0.5669 0.1052

101.96 0.6201 0.1193

M D.S.

42.40 2.4037 0.7601

50.38 2.0528 0.3812

47.19 2.2912 0.4254

41.71 2.7189 0.5049

0.5546 0.1482 101.37 0.3973 0.0888 46.42 2.7080 0.6212

14.99 0.7977 0.2302

19.20 0.9063 0.1683

17.63 0.8660 0.1608

15.24 1.3301 0.2559

17.89 1.000 0.2236

E.S.M. Hemoglobine .... M D.S.

E.S.M.

= = =

0.8528 0.2461

M

D.S. E.S.M.

0.5516 0.1126

0.6593 0.1345

0.2948 0.0601

Moyenne D6viation standard Erreur standard de la moyenne

par plusieurs auteurs (1, 3, 4, 9, 10, 11, 13, 16, 19, 21). Nos valeurs moyennes sont conformes 'a celles deja rapportees; toutefois, les deviations standards sont moins importantes. Mis a part les facteurs enumeres plus haut, le nombre limite de sujets etudies par certains auteurs peut ici etre en cause (10 et 11). Compte tenu de la fragilite des globules rouges du chien, l'hemolyse est facilement produite lors de I'echantillonnage et peut induire des va-

400

5 15.53

18.15

E.S.M.

Hematocrite

4 13.21

M D.S.

E.S.M.

Tempeature

3 16.85

2 17.44

1

riations du taux de potassium plasmatique. Dans nos experiences, les ponctions arterielles ont ete pratiquees avec un maximum de precaution pour minimiser ce phenomene. Enfin, aucune influence anormale de l'equilibre acido-basique sur l'ionogramme n'a pu s'exercer puisque la determination simultanee de 1'equilibre ionique s'est averee normale. Les etudes seriees de poids, de temperature, d'hematocrite et d'hemoglobine

Can. J. comp. Med.

faites chez cinq animaux durant une periode moyenne de 21 jours rev'elent que les variations quotidiennes sont de l'ordre de 3.5% pour le poids, de 5% pour l'hematocrite et l'hemoglobine et de 0.45% pour la temperature. Ces resultats demontrent que les variations quotidiennes des parametres 6tudi6s chez l'animal adapte sont tres peu marquees aussi longtemps que l'animal demeure en bonne sante et que la methode de d6termination est reproduite avec exactitude. Nous n'avons pu retrouver aucun travail analogue exposant ces variations quotidiennes dans la revue de la litterature medicale veterinaire ni clinique. De meme, nous n'avons pu retrouver aucun travail groupant a la fois l'etude simultanee de tous ces parametres hematologique, biochimique et clinique chez le chien vivant dans des conditions experimentales telles que decrites dans la presente etude. BIBLIOGRAPHIE 1. BECKEL, W. E. Soins a prodiguel aux Animaux d'Experience. Brochure publi6e par le Conseil Canadien de Protection des Animaux. 1966. 2. BONNYCASTLE, D. Repeated determinations of plasma volume. Blood volume and total available fluid in a group of normal trained doggs. Am. J. Physiol. 151: 504-508. 1947. 3. BREVER, T., P. S. LARSON and A. P. SCHROEDER. On the effect of epinephrine on blood potassium. Am. J. Physiol. 126: 708-712. 1939. 4. BEAUDOIN, J. et E. AVERAD. Recherche sur la r6gulation de la calcemie chez le chien. Influence du systeme osseux. C.r. Soc. Biol. Paris. 112: 367-369. 1933. 5. BERG, N., A. MAYNE and W. F. PERTERSON. Variability of blood pH. Its association with meteorological factors. Am. J. Physiol. 130: 9-21. 1940. 6. COLES, E. H. Veterinary Clinical Pathology. pp. 82-83. Philadelphia: Saunders. 1967. 7. COLES, E. H. Veterinary Clinical Pathology. p. 80. Philadelphia: Saunders. 1967. S. COLES, E. H. Veterinary Clinical Pathology. p. 75. Philadelphia: Saunders. 1967. 9. COLES, E. H. Veterinary Clinical Pathology. pp. 139-149. Philadelphia: Saunders. 1967.

Vol. 39

-

October, 1975

10. EICHELBERGER, L. and F. C. McLEAN. The distribution of calcium and magnesium between the cells and the extracellular fluids of skeletal muscle and liver in dogs. J. biol. Chem. 142: 467. 1942. 11. EICHELBERGER, L. and F. C. McLEAN. The distribution of water, nitrogen and electrolyte in skin. J. biol. Chem. 151: 177. 1943. 12. JORGENSEN, K. and P. ASTRUP. Standard bicarbonate, its clinical significance and a new method for its determination. Scand. J. clin. lab. Invest. 9: 122. 1957. 13. KANEKO, J. J. and C. E. CORNELIUS. Clinical Biochemistry of Domestic Animals, Second Edition, Vol. 11. p. 95. New York and London: Academic Press. 1971. 14. KANEKO, J. J. and C. E. CORNELIUS. Clinical Biochemistry of Domestic Animals, Second Edition, Vol. 11. p. 96. New York and London: Academic Press. 1971. 15. KRIEGER, H., J. P. STORAASLI, H. L. FRIEDELL and W. D. HOLDEN. A comparative study of blood volume in dogs. Proc. Soc. exp. Biol. Med. 68; 511-515. 1948. 16. MEDWAY, W., J. E. PRIER and J. S. WILKINSON. Textbook of Veterinary Clinical Pathology. p. 18. Baltimore: The Williams and Wilkins Co. 1969. 17. MEDWAY, W., J. E. PRIER and J. S. WILKINSON. Textbook of Veterinary Clinical Pathology. p. 207. Baltimore: The Williams and Wilkins Co. 1969. 18. MEDWAY, W., J. E. PRIER and J. S. WILKINSON. Textbook of Veterinary Clinical Pathology. p. 216. Baltimore: The Williams and Wilkins Co. 1969. 19. MICHAELSON, S. M., KATHLEEN SCHEER and SUZANNE GILT. The blood of the normal Beagle. J. Am. vet. med. Ass. 148: 532-534. 1966. 20. RAYMOND, R. Technicon. Technique mise au point au laboratoire de biochimie de l'Hopital SainteJustine. Bulletin de l'H6pital Sainte-Justine. Vol. I, p. 3. 1966. 21. ROBINSON, F. R. and R. F. ZEIGLER. Clinical laboratory values of Beagle dogs. Lab. Anim. Care 18: 39-49. 1968. 22. SCHALM, 0. W. Veterinary Hematology, Second Edition. Philadelphia: Lea and Febiger. 1965. 23. STORAASLI, J. P., H. KRIEGER, H. L. FRIEDELL and W. D. HOLDEN. The use of radioactive iodinated plasma protein in the study of blood volume. Surgery, Gynec. Obstet. 91: 458. 1950. 24. VAN STEWART, E. and B. B. LONGWELL. Normal clinical chemical values for certain constituents of blood of Beagle dogs 13 + 1 month old. Am. J. vet. Res. 30: 907-916. 1969. 25. VITYE, B. et C. CHARTRAND. Determinations seriees du volume sanguin chez le chien par le ASH 131. Un. med. Canada 101: 698-700. 1972. 26. WINTROBE, N. M. and H. B. SHUMACKER, Jr. Values for normal size and hemoglobin content of erythrocyties in normal dogs, rabbits and rats. Am. J. Physiol. 114: 502-507. 1936.

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[Hematological and biochemical normogram and daily variations of the base parameters in the normal dog].

These experiments were designed in order to determine normal hematological and biochemical values of normal dogs living in a laboratory environment. T...
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