Klin. Pädiatr. 203 (1991)
173
Fructosamin im Serum gesunder und diabetiseher Kinder und Jugendlicher H. Schlebusch', N. Liappis 2 , M. Sorger 3 , 1. Pajjenholz l , H. eh. Koch 2 'Zentrum für Geburtshilfe und Frauenheilkunde (Direktor: Prof. Dr. Krebs) 'Zentrum für Kinderheilkunde (Direkror: Prof. Dr. Centre) und 'Medizinische Poliklinik der Universität Bonn (Direktor: Prof. Dr. Vetter)
Die Bestimmung der Fructosaminkonzentration im Serum von gesunden Neugeborenen, Kindern und Jugendlichen mit einer neuen kolorimetrischen Methode führt zu einem altersabhängigen Referenzbereich. Bezieht man die Fructosaminwerte auf Gesamteiweiß, so ergibt sich ein altersunabhängiger Median der Ergebnisse und die obere Grenze des Referenzbereichs unterscheidet sich nicht signifikant von der gesunder Erwachsener; dies gilt nicht beim Bezug auf Albumin. Da die glykierten Serumproteine eine kürzere Halbwertszeit (im Mittel 20 Tage) aufweisen als Hämoglobin Ale. kann die Fructosaminkonzentration wichtige zusätzliche Hinweise über die Stoffwechsellage von Kindern und Jugendlichen mit Diabetes mellitus geben (mittelfristiges Blutzuckergedächtnis).
Fructosamin in the Serum of Normal and Diabetic Children and Adolescents The determination of fructosamine in serum of healthy newborns, children and adolescents by a new colorimetric method leads to an age-dependent reference range. Correction of the values for total protein yields a median of the results, which is not dependent on age and the upper limit of the reference range is not significantly different from that of healthy adults; this does not hold true for referral to albumin. As the half-life time of glycated serum proteins is shorter (mean 20 days) than that of hemoglobin Ale. fructosamine can provide useful additional informations about the diabetic control of children and adolescents (medium-term record of blood glucose).
Einleitung Das Schicksal des diabetischen Kindes und Jugendlichen wird in nicht unerheblichem Maß von der Qualität seiner Stoffwechseleinstellung bestimmt (I). Die Vermeidung oder Verminderung diabetischer Spätschäden stellt hohe Anforderungen an die Qualität der Langzeitbehandlung; die dazu notwendige "intensivierte" Insulintherapie bedarf jedoch qualifizierter Kontrollparameter. Klin. Pädiatr. 203 (1991) 173-177 © 1991 F. Enke Verlag S{uttgart
Zu diesem Kontrollsystem gehört die ggf. mehrmalige tägliche Selbstkontrolle von Blut- und/oder Urinzucker. Darüberhinaus sind jedoch Parameter nötig, die über eine "Momentaufnahme" der Stoffwechsellage hinausgehen und längerfristige Informationen vermitteln. Inzwischen ist die Bestimmung des glykosylierten (glykierten) Hämoglobins zur objektiven Bewertung der mittleren Stoffwechseleinstellung des Diabetikers der letzten 6-8 Wochen vor der Probennahme weithin akzeptiert (2, 3, 4, 5). Dies gilt, obwohl Präzision und Richtigkeit der Ergebnisse vielfach als nicht ausreichend angesehen werden (6, 7) und verschiedene Bestimmungsmethoden zu unterschiedlichen Werten führen, die nicht ohne weiteres miteinander vergleichbar sind (8, 9, 10). Gerade bei Kindern und Jugendlichen mit ihrer oft inkonstanten Stoffwechselsituation erscheint jedoch eine zusätzliche Meßgröße zur kürzerfristigen Beurteilung der Einstellung erforderlich. Die von Johnson, Metcalf und Baker 1983 erstmals beschriebene Fructosaminbestimmung (11) könnte dieser Forderung entsprechen (12, 13). Die Methode geht von folgender Beobachtung aus: Proteine reagieren in vivo mit Glucose unter Bildung von Ketoaminen, für die sich die Bezeichnung "Fructosamine" durchgesetzt hat. Diese Fructosamine können unter geeigneten Bedingungen im alkalischen Milieu Nitroblautetrazolium (NBT) zu einem Formazanfarbstoff reduzieren; die Bildungsgeschwindigkeit dieses Farbstoffs dient als Meßgröße für die in der Probe enthaltene Fructosaminkonzentration.
Im Organismus werden - abhängig von der Glucosekonzentration - nicht nur Albumin, sondern auch andere Plasmaproteine glykiert. Bei Gesunden ist der Glykierungsgrad des Totalproteins kleiner als 2070, bei schlecht eingestellten Diabetikern kann er bis zu 20070 ansteigen, wobei es bei den verschiedenen Plasmaproteinen zu erheblichen Unterschieden im Ausmaß der Glykierung kommt (14, 15, 16). Die wichtigsten glykierten Serum proteine haben eine wesentlich kürzere Halbwertszeit als Hämoglobin (Albumin: 15-19 Tage, Immunglobulin G: 24 Tage) .(14, 15). Der Fructosaminwert gibt daher eine Information über die Stoffwechsellage in den letzten 2-3 Wochen ("mittelfristiges Blutzuckergedächtnis" (17». Veränderungen des Stoffwechsels können somit schneller erkannt werden als durch die HbA r - bzw. die HbAIc-Bestimmungo
Heruntergeladen von: NYU. Urheberrechtlich geschützt.
Zusammenfassung
H. Schlebusch et al.
Klin. Pädiatr. 203 (/991) Die Methode zur Fructosaminbestimmung konnte kürzlich durch eine Optimierung der Reaktionsbedingungen und eine neue Standardisierung entscheidend verbessert werden (17. 18, 19). Aufgabe der vorliegenden Arbeit ist es, mit diesem neuen Test Referenzwerte für Neugeborene, Kinder und Jugendliche zu ermitteln und an ausgewählten Beispielen die Ergebnisse einer gleichzeitigen Bestimmung von Fructosamin und HbA, bei diabetischen Kindern zu disk utieren.
Material und Methoden
a) Probanden und Patienten Zur Ermittlung der Referenzbereiche wurden 51 Seren von Neugeborenen und 252 Seren von Kindern und Jugendlichen im Alter zwischen I Monat und 18 Jahren analysiert. Die Auswahlkriterien für die Referenzpopulation sind in Tabelle I und 2 zusammengefaßt. Die diabetischen Patienten (Alter: 5-12 Jahre) stellten sich in monatlichen Abständen in der Diabetes-Ambulanz des Zentrums für Kinderheilkunde der Universität Bonn vor.
b) Methoden Die Fructosaminbestimmung wurde mit einer verbesserten Version (18) der NBT-Methode nach Johnson et al. (11) durchgeführt. Reagentien: BoehringerMannheim (Bestell-Nr. 1054686). Für die Gesamteiweißbestimmung wurde die Biuret-Methode (BoehringerMannheim 704105), für die Albuminbestimmung die Bromkresolgrün-Methode (Boehringer-Mannheim 704008) verwendet. Hämoglobin AI wurde durch Ionenaustauschchromatographie unter Verwendung von Mikrosäulen (Boehringer-Mannheim 575453) bestimmt. Alle Messungen erfolgten in Doppelwerten.
Tab. 1 Auswahlkriterien tür Neugeborene zur Ermittlung des Fructosamin-Referenzbereiches
11 Normaler Schwangerschattsverlauf 21 NormgewIchtiges Kind, geboren in der 38.-40. SSW 3) Bilirubin unter 3 mg/dl 4) Nabelarterlen-pH > 7,25 5) Kein Blutglucose-Abtall unter 40 mg/dl 61 Keine Therapie notwendig Iz B Phototherapie, Warmebett, Medikamentel
Tab. 2 AuswahlkrIterien für Kinder und Jugendliche zur Ermittlung des Fructosamln-Reterenzberelches
c) Geräte Fructosamin: Eppendorf ACP 5040 (Details bei (18». Präzision von Tag zu Tag: VK 1,6070 GesamteiweißIAlbumin: Hitachi 705 Präzision von Tag zu Tag: VK 0,9070 bzw. I, I 070 =0
=0
d) Berechnungen Der Bezug der Fructosaminwerte auf Eiweiß erfolgte mit Hilfe der Formel . Fructosamm (korr)
Keine anamnestische Belastung Normale Größe und normales GeWicht Keine auffalligen Laborparameter zur Zelt der Untersuchung Keine chronischen Erkrankungen Keine Medikamente zur Zelt der Untersuchung
Fructosamin (gemessen) 72 x , Gesamteiweiß (gemessen)
Als Bezugsgröße (7,2 g/dl Gesamteiweiß) wurde der Medianwert des Gesamteiweißes im Serum für ein Kollektiv von 977 klinisch gesunden Probanden gewählt (20). Der Bezug auf Albumin erfolgte in analoger Weise. Die Bezugsgröße beträgt hier 4,7 g/dl Albumin; sie stellt den Median der Albuminkonzentration des von uns untersuchten Kollektivs von 252 Kindern und J ugendlichen dar.
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Die Bestimmung der Fructosaminkonzentration im Serum von gesunden Neugeborenen, Kindern und Jugendlichen mit einer neuen kolorimetrischen Methode führt zu einem altersabhängigen Referenzbereich. Bezieht man die Fructosaminwerte auf Gesamteiweiß, so ergibt sich ein altersunabhängiger Median der Ergebnisse und die obere Grenze des Referenzbereichs unterscheidet sich nicht signifikant von der gesunder Erwachsener; dies gilt nicht beim Bezug auf Albumin. Da die glykierten Serumproteine eine kürzere Halbwertszeit (im Mittel 20 Tage) aufweisen als Hämoglobin Ale. kann die Fructosaminkonzentration wichtige zusätzliche Hinweise über die Stoffwechsellage von Kindern und Jugendlichen mit Diabetes mellitus geben (mittelfristiges Blutzuckergedächtnis).
Fructosamin in the Serum of Normal and Diabetic Children and Adolescents The determination of fructosamine in serum of healthy newborns, children and adolescents by a new colorimetric method leads to an age-dependent reference range. Correction of the values for total protein yields a median of the results, which is not dependent on age and the upper limit of the reference range is not significantly different from that of healthy adults; this does not hold true for referral to albumin. As the half-life time of glycated serum proteins is shorter (mean 20 days) than that of hemoglobin Ale. fructosamine can provide useful additional informations about the diabetic control of children and adolescents (medium-term record of blood glucose).
Einleitung Das Schicksal des diabetischen Kindes und Jugendlichen wird in nicht unerheblichem Maß von der Qualität seiner Stoffwechseleinstellung bestimmt (I). Die Vermeidung oder Verminderung diabetischer Spätschäden stellt hohe Anforderungen an die Qualität der Langzeitbehandlung; die dazu notwendige "intensivierte" Insulintherapie bedarf jedoch qualifizierter Kontrollparameter. Klin. Pädiatr. 203 (1991) 173-177 © 1991 F. Enke Verlag S{uttgart
Zu diesem Kontrollsystem gehört die ggf. mehrmalige tägliche Selbstkontrolle von Blut- und/oder Urinzucker. Darüberhinaus sind jedoch Parameter nötig, die über eine "Momentaufnahme" der Stoffwechsellage hinausgehen und längerfristige Informationen vermitteln. Inzwischen ist die Bestimmung des glykosylierten (glykierten) Hämoglobins zur objektiven Bewertung der mittleren Stoffwechseleinstellung des Diabetikers der letzten 6-8 Wochen vor der Probennahme weithin akzeptiert (2, 3, 4, 5). Dies gilt, obwohl Präzision und Richtigkeit der Ergebnisse vielfach als nicht ausreichend angesehen werden (6, 7) und verschiedene Bestimmungsmethoden zu unterschiedlichen Werten führen, die nicht ohne weiteres miteinander vergleichbar sind (8, 9, 10). Gerade bei Kindern und Jugendlichen mit ihrer oft inkonstanten Stoffwechselsituation erscheint jedoch eine zusätzliche Meßgröße zur kürzerfristigen Beurteilung der Einstellung erforderlich. Die von Johnson, Metcalf und Baker 1983 erstmals beschriebene Fructosaminbestimmung (11) könnte dieser Forderung entsprechen (12, 13). Die Methode geht von folgender Beobachtung aus: Proteine reagieren in vivo mit Glucose unter Bildung von Ketoaminen, für die sich die Bezeichnung "Fructosamine" durchgesetzt hat. Diese Fructosamine können unter geeigneten Bedingungen im alkalischen Milieu Nitroblautetrazolium (NBT) zu einem Formazanfarbstoff reduzieren; die Bildungsgeschwindigkeit dieses Farbstoffs dient als Meßgröße für die in der Probe enthaltene Fructosaminkonzentration.
Im Organismus werden - abhängig von der Glucosekonzentration - nicht nur Albumin, sondern auch andere Plasmaproteine glykiert. Bei Gesunden ist der Glykierungsgrad des Totalproteins kleiner als 2070, bei schlecht eingestellten Diabetikern kann er bis zu 20070 ansteigen, wobei es bei den verschiedenen Plasmaproteinen zu erheblichen Unterschieden im Ausmaß der Glykierung kommt (14, 15, 16). Die wichtigsten glykierten Serum proteine haben eine wesentlich kürzere Halbwertszeit als Hämoglobin (Albumin: 15-19 Tage, Immunglobulin G: 24 Tage) .(14, 15). Der Fructosaminwert gibt daher eine Information über die Stoffwechsellage in den letzten 2-3 Wochen ("mittelfristiges Blutzuckergedächtnis" (17». Veränderungen des Stoffwechsels können somit schneller erkannt werden als durch die HbA r - bzw. die HbAIc-Bestimmungo
Heruntergeladen von: NYU. Urheberrechtlich geschützt.
Zusammenfassung
H. Schlebusch et al.
Klin. Pädiatr. 203 (/991) Die Methode zur Fructosaminbestimmung konnte kürzlich durch eine Optimierung der Reaktionsbedingungen und eine neue Standardisierung entscheidend verbessert werden (17. 18, 19). Aufgabe der vorliegenden Arbeit ist es, mit diesem neuen Test Referenzwerte für Neugeborene, Kinder und Jugendliche zu ermitteln und an ausgewählten Beispielen die Ergebnisse einer gleichzeitigen Bestimmung von Fructosamin und HbA, bei diabetischen Kindern zu disk utieren.
Material und Methoden
a) Probanden und Patienten Zur Ermittlung der Referenzbereiche wurden 51 Seren von Neugeborenen und 252 Seren von Kindern und Jugendlichen im Alter zwischen I Monat und 18 Jahren analysiert. Die Auswahlkriterien für die Referenzpopulation sind in Tabelle I und 2 zusammengefaßt. Die diabetischen Patienten (Alter: 5-12 Jahre) stellten sich in monatlichen Abständen in der Diabetes-Ambulanz des Zentrums für Kinderheilkunde der Universität Bonn vor.
b) Methoden Die Fructosaminbestimmung wurde mit einer verbesserten Version (18) der NBT-Methode nach Johnson et al. (11) durchgeführt. Reagentien: BoehringerMannheim (Bestell-Nr. 1054686). Für die Gesamteiweißbestimmung wurde die Biuret-Methode (BoehringerMannheim 704105), für die Albuminbestimmung die Bromkresolgrün-Methode (Boehringer-Mannheim 704008) verwendet. Hämoglobin AI wurde durch Ionenaustauschchromatographie unter Verwendung von Mikrosäulen (Boehringer-Mannheim 575453) bestimmt. Alle Messungen erfolgten in Doppelwerten.
Tab. 1 Auswahlkriterien tür Neugeborene zur Ermittlung des Fructosamin-Referenzbereiches
11 Normaler Schwangerschattsverlauf 21 NormgewIchtiges Kind, geboren in der 38.-40. SSW 3) Bilirubin unter 3 mg/dl 4) Nabelarterlen-pH > 7,25 5) Kein Blutglucose-Abtall unter 40 mg/dl 61 Keine Therapie notwendig Iz B Phototherapie, Warmebett, Medikamentel
Tab. 2 AuswahlkrIterien für Kinder und Jugendliche zur Ermittlung des Fructosamln-Reterenzberelches
c) Geräte Fructosamin: Eppendorf ACP 5040 (Details bei (18». Präzision von Tag zu Tag: VK 1,6070 GesamteiweißIAlbumin: Hitachi 705 Präzision von Tag zu Tag: VK 0,9070 bzw. I, I 070 =0
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d) Berechnungen Der Bezug der Fructosaminwerte auf Eiweiß erfolgte mit Hilfe der Formel . Fructosamm (korr)
Keine anamnestische Belastung Normale Größe und normales GeWicht Keine auffalligen Laborparameter zur Zelt der Untersuchung Keine chronischen Erkrankungen Keine Medikamente zur Zelt der Untersuchung
Fructosamin (gemessen) 72 x , Gesamteiweiß (gemessen)
Als Bezugsgröße (7,2 g/dl Gesamteiweiß) wurde der Medianwert des Gesamteiweißes im Serum für ein Kollektiv von 977 klinisch gesunden Probanden gewählt (20). Der Bezug auf Albumin erfolgte in analoger Weise. Die Bezugsgröße beträgt hier 4,7 g/dl Albumin; sie stellt den Median der Albuminkonzentration des von uns untersuchten Kollektivs von 252 Kindern und J ugendlichen dar.
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