日耳 鼻

80-1483

THE CHANGES

OF SURFACE

STRUCTURE

-The

SHIGENOBU Department

ON SOFT TISSUE

INDUCED

BY

CO2 LASER IRRADIATION. observation with scanning electron microscope-

of Otolaryngology,

MIHASHI,

Kurume

(Director:

University,

11. Hirano,

The purpose of this paper is to investigate induced by COQ laser irradiation.

M.D. School of .1letlicine, Kurume.

.11.D.)

the changes of surface structure

on soft tissue

The tongue of mongrel dogs was used as the test tissue and

the laser beam was applied to the tissue at a right angle.

The

morphological

changes

studied with a scanning electron microscope. The results were as follows. 1) The immediate changes induced by a fixed irradiation of COs laser were

were

characterized

by u tissue defect like - crater. 2)

The changes on mucosal surface extending

peripherally

from the crater

edge to the

normal area could be graded into three degrees. 3) consisted

The

immediate

effects induced

The former was represented observed

by COs laser irradiation

of the two factors, that is, the phvsio-mechanical in the area of the grade

were the heat effects, which

and the physio-chemical three

change

factor.

and the latter

was

in the area of grade two and one changes.

A80-1483…42010

炭 酸 ガ ス レー ザ ー 照 射 に よ る組 織 表 面 構 造 の 変 化 -走

査 電 子 顕 微 鏡 に よ る 観 察-

久留米大学医学部耳鼻 咽喉科学教室(主任:平野 実教授) 三 矯 重 信 I

ロ マ ニ フ レー タ ー に よ り手術 用 顕 微鏡に 接 続 して 使 用 し

は じ め に 炭酸 ガ ス レー ザ ー は 生 物 組 織 に 照 射 さえしる と,色 調 に 係 な くほ ぼ 完全 に 吸 収 され 熱 エ ネル ギ ー に 変 換 さ れ 関

る.こ の熱 エ ネル ギ ー は きわ め て 高 い の で,照 射 部 位 は瞬 的 に蒸 発 して 組織 欠 韻 を生 じ る.す な わ ち軟 部 組織 間 に

た.な

お 器 械 な らび に 照 射 方 法 の 詳細 に つ い て はす で に

文 献(1)(2)(3)に に す る.実

て報告

した の て こ こでは 略 す る こ と

験 材 料 と して は 成 犬 を 使 用 し,イ

脈 麻 酔 下 に 照 射 を 行 っ た.な

お こ の 際,レ

ソゾー ル 静

ー ザ ー照 射 の

対 す る炭 酸 ガ ス レー ザ ー固 定 照 射 の即 時 的 変 化 はcrater

効 果 を単 純 化 す る た め に 人 射 光 は 舌 下面 粘 膜 に 対 し直 角

形 成が 特 長 で あ る.本 稿 に お いて は 炭 酸 ガス レー ザ ー 照

に 照 射 さ れ る よ う固 定 し た.

後 のcrater表面構造の変化走査型電子顕微鏡に

射直

観 察 試 料 作 製 に二あ た っ て は,照

射 直 後 た だ ちに 照射 部

て観 察 した の で 報 告す る. II

研究方法および対象

使用 した 器 械 は アメ

カ ン *プ

ティカル社 に て開発

位を切除し、生塩水にて洗浄後,2.5%グルタールアルデハイド(燐酸緩衝液,pH7.4)にて前固定を行い、次いで1%オスミウム酸(燐酸緩衝液,pH7.4)にて後固 定 を 行 っ た.そ の 後順 列 ア セ トン 溶 液 に て 脱 水,し,次 され た50W出力 の 外 科用 炭酸 ガス レー ザ ー で,マ イ ケ

12-33



80-1484

三 橋= 炭酸 ガ ス レー ザ ー外 科

で順 列Freon113-ア

セ トン溶 液 に て 置 換 し,フ レオ ン

を 使用 した臨 界 点 乾燥 装 置 に て 乾燥 さ せ,ゴ ール ド パ ラ ジ ウ ム真 空 蒸 着 を施 し,日 本電 子JSM-35型

走査電

顕 に て観 察 した,

図3はcraterの

中心 部 を通 る垂 直 横 断 面 に お け る辺

縁 部 の光 顕 像 で あ る,Craterの

内側 壁 に は きわ め て 薄

い炭 化 層 が あ り,こ の 層 に 接 して 好 塩 基 性色 素 に染 っ た 凝 固 壊 死 層 が 存 在 す る.Crater周

III観 察 成 績

囲 の 組織 障害 範 囲 は

底 部 に おい て 最 も小 で あ り,内 側 壁 よ り辺縁 部 に ゆ くに

図1は 入 射 エ ネ ルギ ー8.8Joules(20W,0.44sec.) に よ り生 じたcraterを

照射 直 後 手術 用 顕 微鏡 に よ り撮

影 した もの で あ る.Craterの

直 径 は2mm内

外 で あ り,

内 側 壁 は 茶 褐色 を呈 し,ご く少 量 の炭 化 片 の 付着 を認 め る.辺 縁 部 は 幾 分盛 りあが り部 分 的 に 炭 化 して お り,そ の 周 辺 部 で は 正 常 粘膜 の 色調 を失 い 蒼 白色 を 呈 し て い る.ま た,crater周

1977

囲 を 詳細 に観 察 す る と飛 散 した きわ

め て 小 さい 炭 化 片 を認 め る こ とが で き る.同 一 照射 条 件 にお け る走 査電 顕 像 を 図2に 示 す.Craterの

従 って 増 大 し,粘 膜 上 皮 面 で 最 も大 で あ る. と くに上 皮 層 に お け る変 化 は 多 彩 で あ り,こ の部 の変 化 は 辺 縁 よ り外 側 健 常 部 に か け て4つ のGradeに

分け

る こ とが で きた2)3). 走 査 電 顕 に おけ る観 察 にお い て は 図3に 付 した 番号 部 位 につ いて 組 織 表 面 構 造 の 変 化 につ い て 観 察 を 行 った. (1)Crater辺

縁 部 を 内 側方 向 よ り観 察 す る と,図4に

示す ご と く,組 織 内 水 分 の 蒸 発 に も とつ く多数 の2次 小

全 景 は火

山 の 噴 火 口に きわ め て 類 似 した様 相 を呈 して い る.内 面 は 不 規 則,凹 凸 不 平 で ス ポ ンジ様 を呈 し,多 数 の2次 小 孔 を認 め る.辺 縁 部 は 隆 起 を 形成 して い る.

図3Crater辺

図120W,0.44sec.(8.8Joules)の よ る 変 化.Crater形

縁 部 の 垂 直 横 断 面(×50)

組 み合 せ に 成 が 特 長 で あ る.

図4Crater内 図220W,0.44sec.の 走 査 電 顕 像(×50)

組 み 合 せ に よ る 変 化.

図3の

番 号(1)に

側 辺縁 部 相 当 す る 部 分.

Crade3(ラ100)

12-34

日耳鼻

三 橋= 炭 酸 ガ ス レー ザ ー外 科

孔 を認 め る.ま た 上 皮 は下 部 組 織 よ り剥 離,隆 起 し,そ

80-1485

(2)Crater辺

縁 部 剥 離 上 皮 外 側 面 の 変 化 を 図7に



の先 端 部 で は 図5に 示 す ご と く大 小 さ ま ざ まの 大 き さの



2次 小 孔 と と もに 一 部 に ひ び わ れ,亀 裂 を 認 め る.上 皮

microridgeは

下 の下 部 組織 は 図6に 示 す ご と くあた か も溶 岩 が 固 ま っ

起 状 を 呈 す と と も に 不 規 則 な しわ を 認 め る の み で あ る.

た よ うな様 相 を呈 して い る.

こ の 部 で は 個 々 の 細 胞 は 識 別 で き ず,細

(3)剥

消 失 し,の

っぺ り して お り,な

離 上 皮 の 基 部 で は,図8に

縁部

胞 表 面 のmicroridgeは

剥離 上 皮先 端 の2次 小

孔 形 成 な らび に亀 裂 像(×480)

図7Crater辺 図3の

縁 剥 離上 皮 外側 部

番 号(2)に

相 当 す る 部 分.

Crade3(×2,000)

図8剥 図3の(3)に 図6Crater内

12-35

部 上 皮 下 組 織 の 凝 固 部(×480)

Crad2(×2,000)

離 上皮 の基 部 相 当 す る部 分,

々の

胞 全 体 と して

しそ の 表 面 は 不 規 則 で あ る.

図5Crater辺

だ らか な

示 す ご と く,個

細 胞 は 識 別 可 能 で あ る が 明 確 で は な い,細 縮 小 傾 向 を 呈 し て い る,細

胞表面の

消失

1977

三 橋= 炭 酸 ガ ス レー ザ ー外 科

80-1486

(4)のさ らに 外 側 部 に お いて は,図9に

示 す ご と く,個

示 す ご と く,そ の 輪 廓 は 多 角 形 で,細 胞 表 面 に は 畝 状の

々の 細 胞 は 明確 に識 別 され 得 る.各 々の 細 胞 は 拡 大 して

細 長 い 隆 起,microridgeを

い るが,核

に 移 行 して い た,

は 反 対 に縮 小 し表 面 よ り幾 分 突 出す る傾 向 を

呈 してい る.細 胞 の境 界部 は 個 々の 細 胞 の 拡 大 に伴 い幾 分 盛 りあ が って い る.細 胞 表 面 の 微 細 構 造 は比 較 的 よ く 保 た れ て い るが,う

ね 状 のmicroridgeは

認 め られ な

い.

IV考

明確 に 認 め る 正常 粘膜 上 皮



可 視 光 線 領域 の レー ザ ー は そ の補 色 に 吸収 され や す い とい う特 長 を有 して い るが,10.6μmの

波 長 を有 す る炭

酸 ガ ス レー ザ ー は生 物 組 織 に照 射 され る と,色 調 に関 係

以 上 の 変 化 はcraterのedgeよ

り500μm内

外に認

め られ る変 化 で あ り,こ れ よ り外 側 部 に お い て は図10に

な くほ ぼ完 全 に吸 収 され て熱 エ ネル ギ ー に 変 換 され る. あ る一 定 の閾 値 以 上 の エ ネル ギ ー が 組 織 に照 射 さ れ る と,組 織 内液 体 成 分 は 瞬 間 的 に蒸 発 し組 織 欠 損 が 生 じる わ け で あ る,こ の 際,レ ー ザ ー 光 を 移 動 さ せ れ ば 切 開 切 除 が 可能 で あ る し,固 定 して 照 射 す れ ばcrater状 織 欠 損が 生 じ る.こ のcraterの

の組

中 心 部 を通 る垂 直 横断

面 に おけ る光 顕 像 を み て み る と,ち ょ う どつ り鐘 を さか さ に した 形 の組 織 欠 損 を 呈 して い る.ま たcrater周



の組 織 障 害 範 囲 は 底 部 に お い て 最 も小 で あ り,内 側 壁 よ り辺 縁 部 に ゆ くに 従 って 増 大 し,粘 膜 上 皮 面 で 最 も大 で あ る.こ の 変 化 は と り もな お さ ず レー ザ ー光 エ ネ ル ギー 分 布 と裏 腹 の 関 係 に あ る.す な わ ち,レ 本 ザ ー光 エ ネル ギ ー分 布 を横 断 面 で み る と,中 心部 で 最 もエ ネ ル ギ ーが 高 く周 辺 部 へ ゆ くに 従 って ス ロー ブ状 に 滅少 す る ガ ウス 分布 を呈 して い る.従 って 中 心 部 す な わ ちcrater底



で は最 も高 い エ ネ'レギ ー が作 用 して組 織 内水 分 は瞬 間 的 に蒸 発 し,底 部 隣 接組 織 へ の 熱 の伝 搬 は組 織 を通 しての 伝 導 のみ に よ り行 わ れ る.こ れ に 対 し辺縁 お よ び そ の外 図9図3の

番 号(4)に Crade1(×2,000)

相 当す る部 分

方 の上 皮 表 面 に お い て は,crater内

部 よ りの組 織 を通 し

ての 熱 の 伝 導 に 加 え,エ ネ ル ギ ー 分 布 曲線 のす そ野 の部 分 よ りの 直 接 照 射 に も とつ く熱 作 用 を受 け る わ け で あ る.そ れ ゆ え にcrater辺

縁 部 よ り外 側健 常 部 にか けて

の 上 皮 層 の 多彩 な 変 化 は きわ め て 高 い熱 作 用 か らよ り低 い熱 作 に 至 る まで の 段 階 的熱 効 果 を 如実 に 示 して い る も の と言 え る. そ こで 走 査電 顕 に よ る観 察 に お いて 認 め られ たcrater の 辺 縁 部 よ り外 側 健常 部 に 至 る上 皮 表 面 の形 態 的 変 化 を ま とめ て み ると ほ ぼ3つ のGradeに

分 け る ことが で き

る. Grade3(図4,7)はcrater辺

縁部の剥離上皮先

端 部 よ りそ の外 側 面 に お け る 変化 で あ り,細 胞 表 面 の microridgeは

消 失 し,無 構 造 化 して お り,個 々 の細 胞

は 識 別 で きず,上 皮 の 剥 離現 象,2次

小 孔 形 成,亀 裂,

ひ び われ な ど組 織 内水 分 →蒸 気 の 相転 移 の 結果 生 じた変 図10図3の 番号(5)に 相 当す る 部分 正 常 扁平 上 皮 像 を呈 して い る(×2,000)

化が 特 長 で あ る.こ の部 の変 化 は文 献(2)で 的観 察 のGmde4に

述べた光顕

相 当し て い る.

12-36

日耳 鼻 三

橋=炭酸

Grade2(図8)は る 変化 で,細

剥 離上 皮 の 基 部 に お い て 認 め られ 胞 表 面 のmieroridgeは

は 不 規則 で あ,細 る。こ

消 失 し,そ

のiiii

胞 全 体 と して は 縮 小 傾 向 を 結 し て い

の 部 の 変 化 は 光 顕 所 見Grade3.coagulation

necrosisの

あ り,細



80-1×1487

2.Crater辺

縁 部 よ り外側健

変 化 は,3つ 3.炭

のGradeに



大 別 で き る.

れ はGrade3に

お い て 代 表 さ れ る物

理 機 械 的 効 果 とGrade2,1に 続 く外側 部 に み られ る 変 化 で

常 部 に 至 る 上 皮表面

酸 ガ ス レーザ ー照 射 の 即時 的 変 化は 熱 効 果 に よ

る も の で あ り,こ

部 に 相 当す る.

Grade1はGrade2に

が,明

ガ ス レー ザ外

お い て 認 め られ る 物J?C':化

学 的 効 果 よ りな る と言える.

胞 表 面 の 微細 構 造 は 比 較 的 よ く 保 た れ て い る

確 なmirroridgeは

て い る が,核

認 め られ な い.細

は 縮 小 して い る.こ

胞 は拡 大 し

れ は 熱 に よ る 核模 な ら

参 1)三

び に 原 形 質 膜 の 透 過性 の 変 化 に よ り 細 胞 内 水 分 の 分 市 移 動 が お こ っ た た め と 考 え られ る.こ 見Grade2に

一 致 し て い る.光

られ たGrade1す

は な く,よ







酸ガスレ

ー ザ 外 科,日耳

酸ガスレ

ー ザ 照射

鼻 ,78;1244-

128,1975. 2)三

橋 重 信:炭

に よ る組

織 変化,日

顕 的観 察 に お い て認 め

な わ ちnuclear

顕 観 察 で 認 め られ な い の は,こ

の 部 の 変化 は 光 顕 所

橋重信:炭

swellingが

走査電

3)

Alihashi,

の 部 の 変 化が 上 皮 表 断 で

り 深 部 に お い て み られ る た め と 解 釈 され る.

S., el al.:

Laser

surgery

logy;

Interaction

of CO2 laser

Ann.

N.Y.

Sci.,

Acad.

in otolaryngo-

and

soft

267; 2o3-294,

tissue.

1976.

以 上 の 走 査 電 顕 に よ る 観 察 に お い て 認 め られ た 所 晃 よ

Acknowledgement り炭 酸 ガ ス レ ー ザ ー 照 射 の 即時 的 変 化 は 熱 効 果 に よ る も の で あ り,こ の 熱 効 果 はGrade3に

お い て代表される

The Jako

織 内 水 分 の 瞬 間 的 蒸 発 に 伴 う 圧 に よ るphysio-mechanical effectとGrade2,1に

anther

is indebted

to Drs.

M.S.

Strong,

G.J.



who

investigations

have

given

with

an

a carbon

opportunity dioxide

to laser

at

perform Boston

お い て み られ る よ り 低 い 熱 作

Universitv. に も と つ く組 織 内 蛋 白 の 凝 固 変 性 を も た ら すphysio chemical

effectの2つ

V結



の 効 果 よ り な る と言 え る.

稿 を 終 わ る に あ た り,研 ス ト ソ 大 学 ス1・ロ



炭 酸 ガ7レ

究 の 機 会 を与 え て ト さった ボ

ン グ 教 授.ヤ

ー コ ー 教 授 お よ び中野教

に 深 謝 の 意 を表 し ま す.

ー ザ ー を 犬 の 舌 下面 粘 膜 に 照 射 し,そ

面 構 造 の 変 化 を 走 査 電 子 顕 微 鏡 に て 観 察 し,以

の 表

下の結論

なお本論

文 の 要 旨 は 第76回日耳鼻

た.

を 得 た. 1.炭

酸 ガ ス レ ー ザ ー固 定 照 射 の即時 ,す

る.

12-37

な わ ちcrater形

的 変 化 は火 山 の 成が特長であ 噴火口状の組織欠損

(原稿受付 昭和52.8.11日)

授 総 会 に て展示講演し

[The changes of surface structure on soft tissue induced by CO2 laser irradiation. The observation with scanning electron microscope (author's transl)].

日耳 鼻 80-1483 THE CHANGES OF SURFACE STRUCTURE -The SHIGENOBU Department ON SOFT TISSUE INDUCED BY CO2 LASER IRRADIATION. observation with sc...
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