Tab. 1 Vergleichende Untersuchungen auf HBV-DNA (Dot-BlotHybrldisierung und Polymerase-Kettenreaktion In 4 1 8 Blutproben
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positiv in Dot-Blot (%)
Blutproben
Abb. 1 Prinzip der Polymerase-Kettenreaktion (21). A: Anlagerung komplementärer Oligonucleotide (Primer 1 und 2). B: Elongation der Primer mit Hilfe von DNA-Polymerase durch Einbau von Nucleotlden und Verdoppelung des genetischen Materials. C: erneute Denaturierung und Prlmeranlagerung.
Abb. 3 Nachweis von HBV-DNA in einer Serumverdünnungsreihe ( l O ^ ' - l O ) bei Einsatz von 5 unvorbehandelter Probe (A) bzw. von 5 DNA-Extrakt aus 5 0 0 Probe (B). Nach Protelnase-K-Verdauung und DNAExtraktion ließ sich die DNA in einer zehnfach höheren Verdünnung nachweisen als nach Einsatz der unvorbehandelten Probe. - 5
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Abb. 2 Hybridisierung von HBV-DNA nach Amplifizierung, elektrophoretlscher Trennung und Southern-Transfer. A: Standard nicht ampliflzierter HBV-DNA. B: ampllfizierter HBV-DNA-Standard. C: Bei drei Patienten ( 1 - 3 ) ist HBV-DNA nachweisbar, bei Fall 2 in einer Konzentration von weniger als 30 Molekülen pro Testansatz. LM =Längenmarker; Mix = Aliquot der Amplifizlerungslösung.
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In) 10 9 1 8
HBs-Antigen
HBe-Antigen
anti-HBe
anti-HBc-IgM
positiv positiv positiv negativ
negativ positiv negativ negativ
positiv negativ negativ positiv
positiv positiv positiv positiv
HBV-DNA positiv
70,0 100,0 100,0 37,5
Tab. 2 Nachweis von HBV-DNA bei 2 8 Patienten mit akuter Hepatitis B
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[The demonstration of hepatitis B virus DNA with the polymerase chain reaction].
Results with the polymerase chain reaction and conventional DNA hybridizing technique (dot-blot) for the detection of hepatitis B virus (HBV) DNA were...